在多肽行业，我们常用的多肽合成的工艺流程，特别是固相多肽合成的流程，具体可以细分为多个步骤。以下是一个典型的固相多肽合成工艺流程，供大家参考：

一、固相合成法

投料与树脂处理：将树脂加入固相合成仪中，用适当的溶剂（如DCM）溶胀树脂，然后抽干。

使用DMF等溶剂洗涤树脂，以去除杂质，洗涤结束后抽干备用。

缩合反应：将第一个氨基酸（通常从C端开始）用一定体积的DMF溶解，并加入缩合剂（如DCC、HBTU等）进行活化。

将活化后的氨基酸溶液投入固相合成仪中，补充DMF至适当反应浓度，搅拌进行缩合反应。

脱除保护基：使用Kaiser试剂等检测反应程度，当反应结束后抽干溶剂。

用DMF洗涤树脂，然后加入适当的碱性溶液（如PIP/DMF溶液）脱除氨基酸N端的保护基（如Fmoc基团）。

再次使用Kaiser试剂检测脱保护反应程度，反应完毕后抽干溶剂并用DMF洗涤，准备加入下一个氨基酸。

缩合循环：按照树脂上预设的氨基酸序列，依次重复上述“脱保护→洗涤→活化氨基酸→投料→缩合→洗涤”的步骤，进行缩合循环操作，直至完成所有氨基酸的连接。

出料与树脂干燥：合成结束后，用适当的溶剂（如IPA和DCM）交叉洗涤树脂，完成树脂的收缩。

将树脂出料至不锈钢托盘等容器中。

在真空干燥箱中室温干燥树脂，干燥完毕后称重并计算收率。

二、树脂裂解与多肽纯化

树脂裂解：配置裂解液（通常包含TFA等强酸），并提前置冰柜中冷藏保存。

将肽树脂加入反应釜中，加入预冷的裂解液，搅拌反应以将多肽从树脂上裂解下来。

裂解结束后放出反应液，抽滤除去树脂并以TFA等溶剂洗涤。

多肽纯化：将裂解液转入旋转蒸发仪中室温浓缩至小体积。

使用适当的沉淀剂（如甲基叔丁基醚）使多肽析出，并通过离心、洗涤等步骤得到粗肽。

使用高效液相色谱（HPLC）等方法对粗肽进行纯化，以去除杂质并分离出目标多肽。

浓缩、过滤与冻干：将纯化后的多肽溶液旋蒸除去有机溶剂，得到浓缩的多肽溶液。

对浓缩后的多肽溶液进行无菌过滤。

将过滤后的多肽溶液置于冻干机中，设定适当的升温程序进行冻干处理。

冻干结束后取出多肽产品，进行包装、入库等后续操作。

需要注意的是，多肽合成的工艺流程可能因具体实验条件、目标多肽的特性以及所使用的合成仪型号等因素而有所不同。因此，在实际操作中应根据具体情况进行调整和优化。同时，为了确保多肽合成的质量和效率，还需要对每一步骤进行严格的质量控制和操作规范。

举例：

序列：RGDAG  700mg  95%

1.根据多肽序列选择Fmoc-Gly-Wang Resin王树脂

2.根据多肽要求确定树脂用量5g

3.秤取5g树脂放到反应柱中，先用约50ml二氯甲烷浸泡1分钟，抽干，加20%六氢吡啶 DMF溶液约50ml，室温下氮气鼓动15分钟。然后抽干，用DMF洗树脂9次。抽干。

4.根据多肽序列加Fmoc-Ala-oH及缩合剂TBTU。根据树脂的重量及取代度计算出K值

K=树脂取代度*树脂重量*2=0.6*5*2=6

Fmoc-Ala-oH用量=分子量*K/1000=311.3*6/1000=1.86g

缩合剂TBTU：0.321*K=0.321*6=1.92g

碱试剂N-甲基吗啡：0.5ml

根据计算的量将Fmoc-Ala-oH，TBTU加到反应柱中，再加约50mlDMF及0.5ml N-甲基吗啡，室温下氮气鼓动25分钟，再抽干，用DMF洗树脂6次。抽干。

取约10-30颗树脂放在试管里加Kaiser试剂约0.5ml，在干式培养器120℃加热1-2分钟，树脂颜色无色表明反应完全。

5.加20%六氢吡啶 DMF溶液约50ml室温下氮气鼓动15分钟，脱去Fmoc，再抽干，DMF洗树脂9次抽干。

6.根据序列依次合成下一个氨基酸，重复第四步的操作过程，及第5步的操作过程。

7.根据多肽序列合成完多肽后，用二氯甲烷洗树脂3次，乙醚洗树脂3次，抽干，干燥。

9.送切割。

10.最后用TFA切割液100ml与缩合上氨基酸的树脂做切割反应，滤液中加乙醚使得多肽析出得到粗品。完成至纯化后得到产品。