答:可以采用化学修饰的方法,比如2'羟基甲基化修饰,磷酸硫代修饰,氟代修饰等常规修饰方法,都可以保证siRNA的稳定性,当然也有学者可以在siRNA的链后面悬挂两个单独碱基T。还有就是合成和纯化以及实验操作中的尽量注意RNA降解即可。PAGE分析,即聚丙烯酰胺凝胶电泳,理论上可以分辨1bp,实际上,在引物的纯化中也常用此种凝胶进行纯化。但由于siRNA很容易降解,尤其在电泳时,需要接触的液体、器皿等都很多,很容易造成在电泳过程中的降解,这样电泳就不易分辨了。如果一定需要分辨,可以采用HPLC或质谱的方法。
问:21nt,22nt,24nt的siRNA如何进行电泳分辨?
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